眼斜视

阿片吸虫病是一种由阿片吸虫属寄生扁虫（吸虫）感染引起的疾病维维里尼阿匹索氏菌和Opisthorchis felineus.在这两个物种中，人类肝吸虫o . viverrini负责绝大多数阿片支睾吸虫病病例6700万年泰国、老挝、越南和柬埔寨有感染风险的人群。

Opistorchis viverrini寄生于两个中间宿主——该属水生蜗牛比提尼亚，发展成自由游动的尾蚴和属于鲤科在皮肤或肌肉中形成囊肿的一科动物（如鲤鱼和小鱼）。哺乳动物宿主可通过食用受感染的生鱼或生鱼而感染。一旦成熟，o . viverrini位于宿主肝脏的胆管内，引起慢性炎症和严重的肝胆损伤，可导致胆管癌（胆管癌）。

由于卫生条件差和污水清除基础设施不理想，寄生虫卵被释放到环境中，感染水生蜗牛宿主，生命周期得以延续。

目前的治疗方法是有效的，但在很大程度上也是不够的，因为它们不能防止下一次吞食受感染的鱼时立即再次感染。

寻找疫苗候选抗原

在寄生虫排泄物中发现的蛋白质，以及tegumental表面这些吸虫的膜，已经被证明在寄生虫的生存和宿主的发病机制中发挥重要作用，因此被认为是有吸引力的目标，开发新的疫苗来治疗和控制感染。

其中一种蛋白质是o . viverrini，以及其他几种吸虫（如血吸虫。)，是四肽-2（TSP-2）。四肽蛋白是一个表面膜锚定蛋白家族，大量存在于细胞的表皮和细胞膜上细胞外小泡（EV）吸虫属。

TSPs有两个典型的环状结构，即小(SELs)和大细胞外环(LEL)域，它们与其他跨膜蛋白相互作用，以稳定、维持和修复寄生虫的被膜。特别是TSP-2的LEL结构域已经被确定为宿主对寄生虫的免疫反应的主要靶点，甚至与寄生虫的能力有关操纵并躲避宿主的免疫系统.

Sujittra Chaiyader和他的同事在之前的研究中甚至发现了这种表皮EV约束TSP被积极内部化人胆管细胞(胆管内壁的细胞)针对寄生虫分泌EV的TSPs亚单位疫苗提供了保护在一个o . viverrini被感染的仓鼠。此外，研究小组发现针对这些tsp的抗体升高阻止寄生电动汽车的吸收由主机cholangiocytes。

在最近的研究来自泰国孔敬大学的研究小组，他们调查了宿主抗体的作用o . viverrini-TSP-2（称为抗Ov-TSP-2抗体）保护感染仓鼠。具体来说，他们测试了IgM的保护能力单克隆抗体1D6和3F5对抗Ov-TSP-2暴露的LEL结构域。

用1D6、3F5或对照免疫后，感染仓鼠o . viverrini(挑战感染)。为了解决这一问题，将Ov-TSP-2-LEL蛋白免疫小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞融合，产生产生抗体的杂交瘤克隆。根据其对Ov-TSP-2-LEL的强反应性，选择2个产生IgM(单克隆)抗体的克隆(1D6和3F5)，纯化后用于仓鼠被动免疫。

免疫仓鼠血清单克隆抗体的检测

从免疫前、激发前感染和激发后的仓鼠血清中测定特异性靶向Ov-TSP-2 LEL结构域的IgG、IgM和IgA抗体，以确定仓鼠对病毒的特异性抗体反应o . viverrini传染

与寄生虫感染前相比，1D6或3F5免疫的仓鼠在激发感染后的血清中显示出显著更高的IgG和IgM水平，表明o . viverrini感染导致宿主对Ov-TSP-2-LEL产生主要免疫反应。

目前尚不清楚这两种IgM单克隆抗体1D6和3F5是否与不同的抗体结合表位然而，在Ov-TSP-2-LEL上，这是需要在未来工作中进行研究的内容。

我免疫提供部分保护，防止感染维维里尼阿匹索氏菌传染

攻毒后7周，收集仓鼠粪便，测定寄生虫卵计数。一周后，对仓鼠实施安乐死，并摘除它们的肝脏，以建立成虫的负担。

与对照组相比，1D6克隆免疫的仓鼠寄生虫负担降低了19.8%，而3F5克隆免疫的仓鼠寄生虫负担显著降低，寄生虫数量减少了74.5%。此外，与对照组相比，3f5免疫组的仓鼠释放的卵子显著减少(67.4%)。另一方面，接种了1D6的仓鼠的卵数没有显著减少，但值得注意的是，在浓度高于3F5的情况下，1D6可能产生保护作用。

宿主胆管细胞对寄生虫EV的摄取在体外还发现1D6（减少97.5%）和3F5（减少97%）都显著减少与免疫前水平以及治疗对照相比，宿主细胞对寄生虫EV摄取的抑制提供了一种可能的机制，通过阻断囊泡介导的宿主-寄生虫相互作用，这种免疫策略可以发挥其作用。

朝着正确的方向前进

这项工作阐明了抗体在推断对TSP-2的保护作用Opistorchis viverrini这是第一次报道成功地对人类肝吸虫感染进行被动免疫。

本文介绍的工作与该小组已经开展的杰出工作一致，表明Ov-TSP-2是一种很有希望的疫苗候选抗原，并进一步支持使用抗体作为一种有效的治疗策略来对抗吸虫四肽。